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文章來源:【泰州市金奧紙業有限公司】是生產定性濾紙,PH試紙,定量濾紙的專業廠家 發布時間:2015/8/22 11:52:33
泰州市金奧紙業有限公司是生產濾紙的專業廠家,專業生產定性濾紙,PH試紙,定量濾紙,與各規格的層析濾紙 、濾油紙、試紙、PH精密試紙、擦鏡紙等。歡迎訪問泰州市金奧紙業有限公司網站:www.ouaidai.com 。
摘要依據酶的專一性、抗原與抗體特異性結合、某些化學試劑的特殊顯色等生物學原理來制作的試紙和能快捷地檢測某些特定的物質或病菌。
關鍵詞:PH試紙作用機理檢測
1利用某些酶檢測物質
1. 1尿糖試紙葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下可形成葡萄糖酸和過氧化氫,過氧化氫再在過氧化氫酶的催化作用下形成水和氧原子,氧原子又可以將顯示劑(聚乙烯毗咯烷酮)氧化成有色的絡合物。將上述兩種酶(葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶)以及顯示劑固定在紙條上,制成測試尿糖含量的酶試紙,可供檢查患者尿糖情況。由于藍色背景物質(顯示劑)的存在,葡萄糖含量不同,試紙由淡藍色(陰性)變綠色、黃色、淺棕色、棕色、深棕色(接近黑色)[l0。
1.2有機磷農藥快速檢側試紙有機磷農藥噴灑果樹和蔬菜,能消滅害蟲,但在水果、蔬菜中會殘留微量農藥,那么如何快速檢測農藥殘留量?有機磷農藥快速檢測試紙中有固定化酶(乙酞膽堿酷酶)、顯色劑(2}6一二氯靛酚)、底物(碘化硫代乙酞膽堿)、pH7. 5的磷酸緩沖液等物質。在pH7. 5環境下,乙酞膽堿酷酶能水解底物碘化硫代乙酞膽堿,而有機磷農藥能抑制乙酞膽堿酷酶的活性,從而影響反應物的生成量,出現不同程度的顏色變化,再利用化學比色分析法對農藥殘留進行定性和定量檢測,靈敏度極高,可達微微克級回。
2利用抗原抗體的專一性結合檢測物質
2.1 HIV病毒檢側試紙HIV病毒檢測試紙由固定有HIV重組抗原和羊抗鼠IgC(免疫球蛋白)的硝酸纖維薄膜、包被有膠體金標記的HIV重組抗原及鼠IgC的玻璃纖維紙片及其他試劑組成。其作用機理是應用膠體金免疫層析技術,采用雙抗原夾心的原理檢測人類血清及血漿樣本中的HIV一1/2抗體。檢測過程中,血液標本加到試劑盒的加樣孔中,樣品首先和玻璃纖維紙片上膠體金標記的HIV重組抗原混合,接著,再往硝酸纖維膜條上層析。如果樣本中含有HIV一1 /2抗體,這些抗體首先與包被HIV重組抗原的膠體金結合,這樣混合物往硝酸纖維膜上層析時,便會被固定有HIV重組抗原的檢測線(T線)捕獲而形成膠體金標記抗原一抗體一抗原的雙抗原夾心免疫復合物,因而在T線出現一條紅色線條,為陽性結果。反之,則不會在T線上形成紅色線條,為陰性結果。另外,在試劑盒上的質控線(C線)包被有羊抗鼠IgC,無論任何情況下都將與鼠IgC一膠體金結合在質控線上出現紅色線條,以證明試劑盒工作正常。
2. 2毒品檢側試紙毒品檢測試紙所依據的是膠體金單克隆抗原、抗體免疫競爭作用原理。當標本中含有嗎啡或其代謝產物的含量達到300 ng / mL時,即與固著在滲透膜上的帶有顯色微小顆粒的有限抗體結合,從而阻比其與測試區(T線區)的抗原相結合,T線區便不會出現沉淀色帶。若標本中不含有毒品或其代謝物,T線區便會出現一條色帶沉淀線。試紙上另一條色帶(C線區)用于確定實驗是否可靠。
2. 3大腸桿菌檢側試紙人體被0157: H7血清型大腸桿菌感染后會引起腸出血性腹瀉,約2%}7%的病人會發展成溶血性尿毒綜合征,兒童與老人最容易出現后一種情況。致病性大腸桿菌可通過污染飲水、食品等引起疾病暴發,病情嚴重者可危及生命。大腸桿菌0157 : H7快速檢測試紙條使用0157:H7大腸桿菌特異性抗體來檢測食品樣品中的大腸桿菌。157 : H7的抗原。用顆粒為20nm的膠體金溶液標記純化羊抗鼠IgC,制備金標探針,噴涂于玻璃纖維膜上。將大腸桿菌0157: H7抗原和抗大腸桿菌0157:H7單克隆抗體分別包被于硝酸纖維膜上作為檢測線和質控線,組裝成鼠血清0157 : H7抗體膠體金免疫層析檢測試紙條[3]。該試紙條操作簡便,lOmin可出結果。
2. 4早孕試紙受孕婦女體內胎盤產生的一種糖蛋白類激素(人絨毛膜促性腺激素),在孕婦的尿液中大量存在,而非妊娠婦女尿液中幾乎不含有該激素。膠體金法早孕檢測試紙采用雙抗體夾心法原理以膠體金為指示標記制作而成。如果尿液中含有一定量的人絨毛膜促性腺激素,隨著層析作用尿液到達金標位置時,尿液中的人絨毛膜促性腺激素與金標中的鼠源性人絨毛膜促性腺激素單抗發生免疫反應;層析到測試線(T線)時,尿液中的人絨毛膜促性腺激素與包埋于T線的人絨毛膜促性腺激素的抗體發生免疫反應,通過人絨毛膜促性腺激素的兩條鏈將金標橋連到測試線上,達到一定量時顯示金的顏色。剩余的金標繼續層析至對照線(C線),金標中的鼠源性人絨毛膜促性腺激素單抗與此處包埋的羊抗鼠多克隆抗體發生免疫反應并顯色。即T線和C線均有紅色條帶顯色時,人絨毛膜促J陛腺激素陽性,表明己經懷孕。若T線不顯色而C線顯色為紅色條帶時為人絨毛膜促性腺激素陰性,表明未懷孕團。
3利用特殊化學試劑顯色檢測物質
3. 1 pH試紙pH試紙顯色原理是試紙上含有甲基紅、嗅甲酚綠、百里酚藍三種指示劑。這三種指示劑在不同pH的溶液中均會按一定規律變色,甲基紅的變色范圍是pH4. 4紅)一6. 2(黃),嗅甲H7N9病毒;H7N9病毒主要存在于家雞的口咽和呼吸道等部位,很可能從這些部位傳播給了人群。在生成H7N9病毒的基因重組過程中,還產生了前所未知的H7 N7病毒,而后者已被證明對雪貂有感染和致病能力。
研究結果揭示了H7N9病毒的源頭和傳播方式,有助于切斷傳播鏈和防控H7N9疫情。而與H7 N9病毒同時產生的H7N7也很可能具有感染人的能力,應警惕其威脅。研究人員強調,從H7N9病毒和H7N7病毒的進化途徑來看,家鴨和家雞會在病毒產生、傳播的過程中相互作用,這說明,不同物種在飼養、繁殖、運輸、銷售過程中最好互相分隔開,避免病毒跨物種傳播及重組生成新型病毒。今酚綠的變色范圍是pH3. 6黃)}5.4(綠),百里酚藍的變色范圍是pH6. 7(黃)一7. 5(藍)。
用定量甲基紅加定量嗅甲酚綠加定量百里酚藍的混合指示劑浸漬中性白色試紙,晾干后制得的試紙可用于測定溶液的pH值。
3.2酒精檢側試紙酒精檢測試條中的反應膜含有能特定的與酒精專一性的反應成分,該反應使一種無色的指示劑氧化而產生藍色。樣品中酒精的濃度與所產生的藍色之深淺成比例。通過與試劑條上比色卡對比,從而半定量的檢測出所測樣品中酒精之含量。
主要參考文獻
口」李麗霞,魯格,俞耀庭.19s7.過氧化氫酶對固定化葡萄糖氧化
酶穩定性的影響.生物工程學報,(1) :24一25
[2]丁國興,工群,宋樹強,等.2006.酶促反應試紙快速檢測有機
磷農藥.中國法醫學雜志,(4) :36 -38
[3]吳斌,工玫,高陽,等.2011.人腸桿菌(0157: 117膠體金試
紙的制備與檢測.食品科技,(4) :51一52
陣]于善謙,工洪海,朱乃碩,等.1999.免疫學導論.北京:高等教育
出版社出版.85一87 O
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